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        小鼠白介素13 ELISA試劑盒實驗操作步驟版

        發布時間: 2017-08-29  點擊次數: 740次

          小鼠elisa試劑盒的實驗步驟您真的了解嗎,上海勁馬帶您一起探討版的實驗方法,助您實驗成功。
        1.編號:將樣品對應微孔按序編號,每板應設陰性對照 2 孔、陽性對照 2 孔、空白對照 1孔(空 白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)
        2.加樣:分別在陰、陽性對照孔中加入陰性對照、陽性對照 50µl。然后在待測樣品孔先加樣品稀釋液 40µl,然后再加待測樣品 10µl。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,
        3.溫育:用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。
        4.配液:將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用
        5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置 30 秒后棄去,如此重復 5 次,拍干。
        6.加酶:每孔加入酶標試劑 50µl,空白孔除外。
        7.溫育:操作同 3。
        8.洗滌:操作同 5。
        9.顯色:每孔先加入顯色劑 A50µl,再加入顯色劑 B50µl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15 分鐘.
        10.終止:每孔加終止液 50µl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。
        11.測定:以空白空調零,450nm 波長依序測量各孔的吸光度(OD 值)。 測定應在加終止液后 15 分鐘以內進行。

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